生物安全柜內(nèi)如何科學分區(qū)擺放工具
1 概述
今天的文章和大家分享生物安全柜(以下簡稱BSC)操作使用上的注意事項,包括:如何開關、工具如何分區(qū)擺放、運行時如何避免污染。
BSC是一種半密閉的通風設備,它為實驗操作者提供潔凈空氣,并且潔凈空氣按特定方向持續(xù)吹出。
BSC內(nèi)提供了一個供操作者擺放實驗工具和操作的臺面,當設備運行時,臺面內(nèi)的空間會持續(xù)獲得經(jīng)過過濾的潔凈空氣;設備不運行時,可關閉臺面的玻璃門,并執(zhí)行紫外照射消毒。
2 分類
BSC根據(jù)防護等級可以分為I、II和III三種等級。
I級保護樣品無菌,但不保護人員和環(huán)境,適用于低至中等風險的實驗操作;
II級(A1/A2/B1/B2型)同時保護人員、樣品和環(huán)境,適用中等至高風險操作,如病原體培養(yǎng),其中A2和B型可處理揮發(fā)性有毒物質;
III級為全密閉,最高防護級別,用于高危病原體(如埃博拉病毒)。
如果我們的課題研究不涉及高風險病原微生物,那么細胞房內(nèi)一般配備的是II級BSC。
從下方的II級BSC工作原理圖可見,細胞房內(nèi)的空氣經(jīng)過操作臺面前端的氣孔被吸入BSC內(nèi),經(jīng)過內(nèi)部管道流通后,到達操作臺面上方的HEPA濾膜。經(jīng)濾膜過濾后的空氣從上至下吹送至操作臺面。這些吹向臺面的潔凈空氣,當吹過樣品和工具之后就不再潔凈了,它們會再次被臺面前端的氣孔回收進入二次循環(huán)。這樣,就確保了不潔凈的空氣不會吹出臺面進而污染操作者和環(huán)境。
所以說,II級BSC能保護樣品也能保護人員和環(huán)境。
3 如何開關
在每一次實驗操作之前,應該先擦拭干凈臺面,把稍后操作要用的工具按一定規(guī)則擺放好,然后關上玻璃門,設置紫外照射30分鐘,此時,人應遠離BSC等待消毒結束。
消毒結束后,關閉紫外,拉起玻璃門至適當高度(通常設備會有提示限高位置,超出后無法打開風機或報警),然后開燈和打開風機。等待內(nèi)部氣流穩(wěn)定5-10分鐘后,人再坐下來操作。
實驗操作結束后,清潔臺面,此時仍然應該讓風機繼續(xù)運行5-10分鐘,目的是把內(nèi)部空氣完成過濾。
4 如何擺放操作臺面呈矩形,工具擺放時應遵循科學分區(qū)原則:1 將臺面分為潔凈區(qū)、操作區(qū)和污染區(qū);2 操作區(qū)在中間位置,潔凈區(qū)和污染區(qū)不相鄰;3 工具應盡量均勻展開,彼此不遮擋。潔凈區(qū)應擺放樣品和一次性耗材,例如吸頭、移液管、離心管、培養(yǎng)瓶皿。
操作區(qū)是實驗操作的區(qū)域,中間位置盡量留空,靠內(nèi)側的位置可擺放移液器、試劑瓶。
污染區(qū)是存放廢棄物的地方,可以把廢液缸、垃圾桶放在這里,但應盡量靠內(nèi)側、靠遠端放置(應確保與它們距離最近的瓶皿、設備至少相隔30厘米或以上)。
5 使用注意事項首先,正式操作時,操作者的手會多次伸入臺面,并在里面移動。我們應注意:1 手臂應與臺面呈垂直方向伸入;2 在內(nèi)部左右移動時速度不要過快(見下圖)。這樣可以盡量降低手臂移動對垂直氣流帶來的擾動。
其次,臺面上的工具會被拿來拿去,要切記:1 工具用完后不要放錯區(qū)域;2 工具擺放的位置絕對不能擋住進氣孔。
第二點的原因是避免工具擋住進氣孔,造成污染的空氣無法被回收,從而釋放到實驗室內(nèi),同時也會造成外部污染的空氣進入BSC時不能全部被吸入進氣孔,造成污染臺面。
最后,是盡量避免樣品、試劑被氣流長時間對著直接吹。這一點可能有點難理解,我們舉例說明。
例如,培養(yǎng)皿的蓋子打開后,手應該拿著蓋子擋住上方的氣流,而不是直接讓皿內(nèi)的培養(yǎng)物被氣流持續(xù)吹著。一方面是防止空氣污染(雖然可能性很小),另一方面是避免強大的氣流把培養(yǎng)物內(nèi)可能存在的污染吹出來。同理,試劑瓶也是如此。
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